연속 희석을 수행하는 방법

콘텐츠

• 단계
• 방법 1 간단한 희석 수행
• 방법 2 최종 희석 계수 및 농도 계산

화학에서 희석은 주어진 용액의 농도를 낮추는 것으로 구성됩니다. 연속 희석은 단순히 희석 인자를 빠르게 증폭시키기 위해 원래 용액의 반복 희석이다. 이러한 유형의 희석은 로그 스케일에서 농도 곡선을 포함하거나 특정 배지에서 박테리아의 밀도를 계산할 수있는 것과 같이 고도로 희석 된 용액과 높은 정확도를 요구하는 실험 중에 종종 수행됩니다. 그들은 생화학, 미생물학, 약리학 또는 화학에서 매우 자주 수행됩니다.

단계

방법 1 간단한 희석 수행

1. 
   

   
   올바른 희석액 (또는 희석제)을 결정하십시오. 희석제의 선택은 매우 중요하며 희석하려는 용액에 따라 다릅니다. 희석제는 종종 증류수이지만 체계적이지 않습니다. 따라서, 박테리아 또는 세포를 함유하는 용액의 경우, 배양 배지가 대신 사용된다. 연속 희석의 경우, 동일한 희석제가 모든 튜브에 사용됩니다.
   • 어떤 희석액을 사용해야하는지 잘 모르는 경우 유능한 사람의 도움을 받거나 인터넷에서 유사한 경험을 위해 사람들이해야 할 일을 찾아보십시오.

2. 
   

   
   9 ml의 희석액을 포함하는 여러 테스트 튜브를 준비하십시오. 이 시험관은 연속 희석을 위해 사용됩니다. 원리는 간단합니다. 시작 용액의 샘플을 채취하여 다음 튜브로 옮긴 다음이 튜브의 샘플을 채취하여 다음 튜브에 넣습니다.
   • 희석을 시작하기 전에 나중에 혼동을 피하기 위해 시험관을 미리 식별하는 것이 좋습니다.
   • 각 튜브에서 이전 튜브보다 농도가 10 낮습니다. 첫 번째 튜브에는 10, 2, 100, 3, 1000 등의 희석 된 용액이 포함됩니다. 필요 이상으로 많은 튜브를 만들고 불필요한 희석제를 낭비하지 않도록 희석 횟수를 미리 결정하십시오.

3. 
   

   
   
   
   모액으로 테스트 튜브를 준비하십시오. 최소 2ml를 넣으십시오. 연속 희석을위한 최소 스톡 용액의 양은 1 밀리리터입니다. 가능한 두 번째 희석을 위해 2 ml를 허용하십시오. 이 모액 튜브는 "SM"으로 표시 할 수 있습니다.
   • 연속 희석을 시작하기 전에 시작 용액을 잘 혼합하십시오.

4. 
   

   
   첫 번째 희석하십시오. 스톡 용액 1ml를 "SM"으로 표시된 시험관에 피펫 팅하고이 양을 표시된 시험관으로 옮깁니다. 1/10 이미 9ml의 희석액을 포함하고 있습니다. 균일 한 용액을 얻기 위해 혼합. 이 튜브에는 10ml의 용액이 있습니다 : 1ml의 원액 및 9ml의 희석액. 이 새로운 솔루션은 이전 솔루션보다 10 배 덜 집중되어 있습니다.

5. 
   

   
   두 번째 희석을 수행하십시오. 두 번째 연속 희석에서는 1ml의 라벨링 된 튜브 용액을 추출합니다. 1/10 그리고 당신은 튜브에 부어 것입니다 1/100 이미 9ml의 희석액을 포함하고 있습니다. 튜브 1/10 샘플링 전에 잘 혼합되었을 것입니다. 이송이 완료되면 튜브를 잘 혼합하십시오 1/100. 표시된 튜브의 솔루션 1/10 라벨이 붙은 튜브보다 10 배 더 농축 1/100.

6. 
   

   
   
   
   필요한 경우이 조작을 반복하십시오. 이 절차는 원하는 희석이 달성 될 때까지 원하는만큼 반복 될 수있다. 농도 곡선과 관련된 실험의 경우, 단위, 10 분의 1 (1/10), 100 분의 1 (1/100) 또는 천분의 1 (1/1000)로 희석 된 일련의 용액을 얻을 수 있습니다.

방법 2 최종 희석 계수 및 농도 계산

1. 
   

   
   계산 비율 연속 희석 후 최종 희석. 희석의 총 비율은 희석이있는 횟수만큼 희석 계수에 그 자체를 곱함으로써 얻어진다. 수학적으로 공식은 다음과 같습니다. 디_티 = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_N와 함께 디_티 총 희석 계수를 나타내는 디_N희석 비율.
   • 따라서 액체를 연속해서 4/10의 1/10 희석을 수행한다고 가정합시다. 공식에서 희석 계수를 값으로 대체하십시오. D_티 = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
   • 연속 희석에서 네 번째 튜브의 최종 희석 계수는 1/10 000입니다. 마지막 튜브의 용액 농도는 이제 원래 용액의 농도보다 10,000 배 낮습니다.

2. 
   

   
   희석 후 용액의 농도를 결정하십시오. 연속 희석 후 용액의 최종 농도를 찾으려면 시작 농도를 알아야합니다. 공식은 다음과 같습니다. C_최후의 = C_초기/ A와 함께 C_최후의 희석 된 용액의 말단 농도를 나타내고, C_초기, 원액의 농도 및 디희석 비율은 미리 결정된다.
   • 따라서 ml 당 1,000,000 세포의 농도로 세포 용액을 희석하고 희석 비율을 1,000으로 설정하면 희석 된 시료의 최종 농도는 얼마입니까?
   • 공식을 사용하십시오.
     • C_최후의 = C_초기/ A
     • C_최후의 = 1 000 000/1 000
     • C_최후의 = 1000 세포 / ml

3. 
   

   
   사용 된 장치에주의하십시오. 계산할 때는 항상 같은 단위를 사용하고 있는지 확인하십시오. 따라서 ml 당 세포 농도에서 시작하면 최종 결과는 ml 당 세포에서도 나타납니다. 시작 농도가 백만 분의 일 (ppm) 인 경우 최종 농도는 백만 분의 일이됩니다.